换一批
换一批猪表皮生长因子在植物乳杆菌中的表达及其活性检测
Expression and characterization of porcine epidermal growth factor in Lactobacillus plantarum
摘要为获得一株高效表达猪表皮生长因子(pEGF)的重组植物乳杆菌,并检测其生物活性,从仔猪肠道内容物中分离植物乳杆菌,选择其中生物活性最强的一株(Lp-1)为宿主.以商品化乳杆菌表达载体pIAβ8为骨架,干酪乳杆菌超强组成型启动子SCP、M6前体蛋白信号肽SP、猪表皮生长因子pEGF等为元件,构建表达pEGF的植物乳杆菌重组表达载体pSCPSE.用电转化方法(2.0 kV,2 000 Ω,25 μF,4.0 ms)将重组载体pSCPSE转化入宿主菌Lp-1中获得重组植物乳杆菌Lp-pSCPSE.以Tricine-SDS-PAGE法和pEGF ELISA特异性检测试剂盒检测目的蛋白的表达;用培养12h的阳性转化子菌体给刚断奶的BALB/c小鼠灌胃,2次/d,连续10 d,以断奶小鼠的体重、肠绒毛长度和隐窝深度的变化为指标,检测目的蛋白的生物活性.Tricine-SDS-PAGE检测和小鼠实验结果显示,重组植物乳杆菌的培养上清中出现6kDa左右pEGF的特异性条带,且表达pEGF的重组植物乳杆菌能显著增加(P＜0.05)断奶小鼠的体重、肠绒毛高度和肠隐窝深度.结果表明,pEGF在植物乳杆菌中成功表达,且具有良好的生物学活性.
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关键词
猪源乳酸杆菌猪表皮生长因子(pEGF)断奶小鼠绒毛高度隐窝深度Lactobacillus planetariumporcine epidermal growth factor (pEGF)early-weaned micevillus heightcrypt depth
栏目名称
动物及兽医生物技术
DOI
10.13345/j.cjb.140544
发布时间
2015-11-03
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