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构建一种基于双启动子模型的特异性检测镉离子的大肠杆菌传感器

Detection of cadmium by a double-promoters based Escherichia coli biosensor

摘要为构建一种能够特异性检测镉离子的大肠杆菌荧光报告菌株,本研究通过对检测元件模式和荧光蛋白的筛选后,以蓝色荧光蛋白mTagBFP2基因作为报告基因,使用双启动子模式,构建融合报告载体Pmer∷merR-m-Pmer∷mTagBFP2-pMD19-T.然后将报告载体转化至E.coli MC4100菌中,构建特异性检测镉离子的微生物传感器,并对此微生物传感器进行了最佳培养基、起始诱导浓度和时间、最适检测范围等相关参数的确定,以及对特异性进行了测定.研究表明,此微生物传感器检测镉离子背景信号低,选定起始菌液浓度为OD600=0.1,于IHMM培养基中诱导2h为最佳检测条件,检测镉离子线性浓度范围为0.1-75 μmol/L,并且只对Cd2+响应,特异性较高.因此,本研究成功构建了能够特异性检测镉离子的生物传感器,为重金属微生物传感器的优化研究工作提供了有用方案.

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生物工程学报

生物工程学报

2015年31卷11期

1601-1611页

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