换一批
换一批采用混合策略提高葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的表达水平
High-level production of glucose oxidase by recombinant Pichia pastoris using a combined strategy
摘要为了提高葡萄糖氧化酶(GOD)在毕赤酵母中的表达水平,提出了甲醇/山梨醇混合碳源诱导和共表达分子伴侣二硫键异构酶(PDI)和透明颤菌血红蛋白(VHb)两种策略.利用对照菌株X33/pPIC9k-GOD在5L发酵罐放大培养时,采用甲醇/山梨醇混合碳源诱导,GOD最终酶活为456 U/mL,比只采用甲醇作为单一碳源诱导时GOD最终酶活提高了20％.利用整合伴侣蛋白菌株X33/pPIC9k-GOD/pPICZ-PDI-VHb在5L发酵罐进行高密度发酵,采用甲醇/山梨醇混合碳源诱导,GOD最终酶活达到716 U/mL,蛋白浓度为7.4 g/L.研究结果对提高外源蛋白在毕赤酵母中的表达有重要参考价值.
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关键词
毕赤酵母葡萄糖氧化酶二硫键异构酶透明颤菌血红蛋白酶山梨醇Pichia pastorisglucose oxidaseprotein disulfide isomeraseVitreoscialla hemoglobinsorbitol
栏目名称
DOI
10.13345/j.cjb.150450
发布时间
2016-08-30
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