构建一种检测水中As3+的敏感型大肠杆菌
Construction of an Escherichia coli strain for sensitive detection of arsenite ion in water
摘要为构建一种敏感性强、特异性好的检测砷离子的大肠杆菌荧光报告菌株,本研究利用基因敲除技术,敲除了大肠杆菌中负责向胞外转运砷离子的arsB基因,构建对As3+敏感的菌株;利用egfp基因作为报告基因,构建融合检测载体pET28b-Pars-arsR-egfp.然后将检测载体pET28b-Pars-arsR-egfp转化至arsB基因敲除菌中完成敏感型As3+检测菌株的构建.接着对此微生物传感器进行了检测条件的优化,以及线性检测范围、最低检出限、特异性等性能的确定.研究结果表明,与利用野生大肠杆菌作为检测宿主相比,此敏感型砷检测菌株对检测As3+的灵敏度有显著提高,最适检测As3+浓度范围为0.013-42.71μmol/L,最低检出下限为5.13 nmol/L.因此,本研究利用基因敲除技术对大肠杆菌进行改造,成功地提高了砷检测微生物传感器的灵敏度,为重金属微生物传感器的优化研究工作提供了有用方案.
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