换一批家蚕B类清道夫受体BmSCRB8基因的克隆及表达
Cloning and expression of scavenger receptor class B BmSCRB8 in silkworm Bombyx mori
摘要B类清道夫受体在动脉粥样硬化及其他心血管疾病的形成或抑制,机体免疫防御,凋亡细胞清除等生理过程中起着重要的作用.克隆了家蚕B型清道夫受体家族的一个成员BmSCRB8基因,通过RACE技术获得BmSCRB8的cDNA全长为2 668 bp,其ORF为1 704 bp,编码567个氨基酸,通过在线预测其蛋白分子量为63.87 kDa,等电点为6.06.采用RT-PCR方法得到了BmSCRB8的时空表达谱,结果表明BmSCRB8在家蚕各组织以及血液各时期均有表达,且在脂肪体中表达量最高,变态发育时期表达量较高.原核表达获得BmSCRB8重组蛋白,并经由蛋白纯化、免疫小鼠后制备得到家蚕BmSCRB8多克隆抗体.同时构建了BmSCRB8真核表达载体并转染家蚕胚胎细胞系.免疫荧光及过表达结果显示BmSCRB8主要定位于细胞膜上,Western blotting 结果显示免疫小鼠后所得到的抗血清可特异性识别BmSCRB8蛋白.
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关键词
家蚕BmSCRB8表达谱多克隆抗体亚细胞定位bombyx moriBmSCRB8expression profilepolyclonal antibodysubcellular localization
栏目名称
DOI
10.13345/j.cjb.160023
发布时间
2016-11-18
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