宏基因组来源新过水解酶的分子克隆与酶学特性
Molecular cloning and characterization of a novel metagenome-derived bacterial perhydrolase
摘要旨在获得具有氯化功能的过水解酶,拓展过水解酶资源,为其工业应用奠定基础.以唐河某造纸厂污泥为材料构建宏基因组文库,通过活性筛选获得一个细菌过水解酶Per822.使用大肠杆菌异源表达Per822,研究纯化后的重组蛋白酶学性质并检测了生成过乙酸的能力.测序结果显示per822编码一个含273个氨基酸的蛋白.Per822是典型的多功能酶代表,分别具有过氧化物酶、卤代酶和酯酶的活性.Per822过水解氯化单氯二甲酮的最适反应pH为4.5,在pH 3.5-8.0范围内酶活性稳定.最适反应温度是55℃,在70℃以下酶活性稳定且氯化活性能够被Fe2+激活.以乙酸乙酯为共底物Per822显示出较强的产过乙酸能力.重组Per822的高可溶性表达、催化多功能性、较强的产过乙酸能力使得Per822在有机合成、废水处理、杀菌、生物质预处理等方面有着潜在的应用价值.
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