嵌合型口蹄疫病毒样颗粒构建、表达及鉴定
Construction, expression and identification of chimeric foot-and-mouth disease virus-like particles
摘要为提高口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)的特异性识别和递呈,为靶向疫苗研究奠定基础,利用反向PCR技术,将卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)第257-264位氨基酸(Amino acids,aa)的短肽嵌入FMDV结构蛋白VP3第171-172位aa或第173-174位aa,通过大肠杆菌表达FMDV结构蛋白VP0、VP1和嵌合型VP3,体外组装得到嵌合OVA257.264肽的病毒样颗粒(VLPOVA).用动态光散射、透射电镜检测VLPOVA大小和形态,免疫印迹、酶联免疫吸附试验和激光共聚焦显微镜检测短肽的嵌入情况.结果 显示在VP3的第173-174位aa嵌入OVA,不影响蛋白表达和VLPs的组装且OVA位于VLPOVA的表面,VLPOVA粒径比VLPs稍大.
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