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无细胞系统在CRISPR技术和生物传感器中的应用研究进展

Application of cell-free transcription and translation system in CRISPR technologies and the associated biosensors

摘要无细胞转录翻译系统(cell-free transcription and translation,TXTL),简称无细胞系统,即基于细胞提取物在体外快速表达蛋白质的系统.该系统绕过了细菌转化、克隆筛选和细胞裂解等过程,更精准便捷地控制反应底物,减少细菌对蛋白质产生的影响,具有多功能性和灵活性等优点.近年来,TXTL 作为一个新兴平台在 clusterd regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)技术研究中应用广泛,实现了对CRISPR/Cas系统快速、便捷地表征,比如高特异性的向导RNA(guide RNA,gRNA)以及抗CRISPR蛋白的筛选.同时,基于TXTL的CRISPR生物传感器与生物材料、基因回路等结合,开发并用于病原体中核酸标志物等的检测,相关试剂冻干后也提高了便携性,实现高灵敏度的即时检测(point-of-care testing,POCT).传感器与可编程的电路元件等技术的结合为全细胞生物传感器(whole cell biosensor,WCB)提供了一种非生物的替代品,提高了生物安全性,加速了其通过监管机构的批准应用.本文重点介绍并讨论了近些年利用TXTL对CRISPR系统的表征及在生物传感器中的应用,希望能更好地推动CRISPR技术和TXTL在生物传感器方面的发展.

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DOI 10.13345/j.cjb.220347
发布时间 2023-03-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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生物工程学报

生物工程学报

2023年39卷1期

86-102页

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