换一批短须嗜热单孢菌聚羟基脂肪酸酯解聚酶的表达、热稳定性改造及在PHB降解中的应用
Expression,thermal stability modification and application in PHB degradation of polyhydroxyalkanoate depolymerase from Thermomonospora umbrina
摘要聚羟基脂肪酸酯解聚酶(polyhydroxyalkanoate depolymerase,PHAD)可用于聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalkanoate,PHA)的降解回收,为开发热稳定性好的 PHAD,本研究在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中成功表达了来自短须嗜热单孢菌(Thermomonospora umbrina)的PHA解聚酶(TumPHAD),并通过二硫键理性设计获得了热稳定性提升的突变体A190C/V240C,其最适温度为 60℃,比野生型提高 20℃,50℃半衰期为 7 h,是野生型酶的 21 倍.将突变体A190C/V240C用于典型PHA之一的聚羟基丁酸酯(polyhydroxybutyrate,PHB)降解,在 50℃条件下,PHB的 2 h和 12 h降解率较野生型分别提高了 2.1 倍和 3.8 倍.本研究获得的TumPHAD突变体A190C/V240C具有耐高温、热稳定性好和PHB降解能力强的特点,对PHB的降解回收具有重要意义.
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关键词
聚羟基脂肪酸酯聚羟基脂肪酸酯解聚酶热稳定性改造二硫键聚羟基丁酸酯polyhydroxyalkanoatepolyhydroxyalkanoate depolymerasethermal stability modificationdisulfide bondpolyhydroxybutyrate
栏目名称
DOI
10.13345/j.cjb.220996
发布时间
2024-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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