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抗FLAG标签抗体在植物中的高效表达

High-level expression of anti FLAG tag antibody in plants

摘要植物生物反应器是一种新兴的重组蛋白表达系统,是分子农业的核心内容之一.本研究在本氏烟草(Nicotiana benthamiana)中表达了抗八肽(DYKDDDDK,FLAG)标签抗体,并对其进行纯化与鉴定.通过多次免疫小鼠获得高效价抗FLAG抗体并测出其编码序列,然后亚克隆至植物DNA病毒表达载体,最后通过农杆菌介导转染烟草叶片.经Western blotting检测了转染后 2-9 d抗体的表达情况:3 d后FLAG抗体开始在烟草叶片中表达,5 d后表达量达到峰值,每千克鲜叶估计可表达 66 mg FLAG抗体.抗体经过分离纯化后浓缩为 1 mg/mL,按 1:10 000稀释仍可识别 1 ng/mL的抗原,表明植物生产的 FLAG 抗体具有高亲和力.植物生物反应器可用于生产高亲和力抗体,并具有简易、成本低和生产周期短等特点,具有很高的应用价值.

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生物工程学报

生物工程学报

2024年40卷1期

269-279页

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