换一批使用优化的信号肽和密码子在Expi293F细胞中高表达重链抗体可变区抗体
High expression of variable domain of heavy-chain antibodies in Expi293F cells with optimized signal peptide and codons
摘要重链抗体可变区抗体(variable domain of heavy-chain antibody,VHH)已被广泛用于药物治疗、诊断和研究.大肠杆菌是生产VHH最常用的表达系统,但可能会导致VHH的生物活性降低.哺乳动物细胞是目前最理想的VHH表达宿主之一.本研究通过优化VHH的信号肽(signal peptide,SP)和密码子,以期提高VHH在Expi293F细胞中的产量.VHH1-Fc被用于筛选SP,通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)筛选出的SP IFN-α2 分泌效果最佳;通过提高基因的GC3和GC含量,VHH1的产量提高了约 1倍,且对VHH1与A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的结合活性无明显影响;其他 5 种重组VHHs分别连接SP IFN-α2 并进行密码子优化,其平均产量大于 191.6 mg/L.此外,这些VHHs在培养上清中具有高纯度和高回收率的优点.本研究证实SP IFN-α2 和密码子优化可以在Expi293F细胞高效表达VHH,为VHH的大规模生产提供了参考.
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关键词
重链抗体可变区抗体信号肽密码子优化表达variable domain of heavy-chain antibody(VHH)signal peptidecodon optimizationexpression
栏目名称
DOI
10.13345/j.cjb.230763
发布时间
2024-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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