摘要尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate-glucose,UDPG)是合成糖苷类化合物的关键糖基供体,蔗糖合酶(sucrose synthase,SuSy)可催化蔗糖与尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)高效合成UDPG.然而,野生型蔗糖合酶热稳定性的不足直接影响了 UDPG 的生产效率.为提升拟南芥(Arabidopsis thaliana)来源蔗糖合酶 AtSuSy 的热稳定性,本研究通过理性设计获得突变体 M5(G744A/N619P/N776H/N192P/N131P).该突变体在 50℃和 55℃下的半衰期分别达到 679.4 min 和110.0 min,较野生型分别提高 15.8 倍和 8.5 倍.此外,其半失活温度(T50)较野生型升高 4.5℃,比酶活达野生型的 1.7 倍.进一步采用双酶级联分批补料策略,实现了红景天苷的高效合成,产量达 23.8 g/L,较野生型提高 78.9%,为糖苷类化合物的高效制备提供了一种有效的酶催化策略.
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