换一批
换一批伴肌动蛋白相关锚定蛋白特异性siRNA筛选及效能评价
Screening and evaluation of a newly designed siRNA targeting nebulin related anchoring protein
摘要目的 设计、合成人伴肌动蛋白相关锚定蛋白(Nebulin related anchoring protein,NRAP)的特异性siRNA,转染人成纤维细胞筛选最佳干扰序列.方法 设计并合成4条针对NRAP的siRNA,以不同浓度转染人成纤维细胞.通过Western blot、RT-PCR法检测其对NRAP mRNA及蛋白表达的抑制效果.结果 siRNA 50mol/L及Lipofectamine2000 1μl有较高的转染效率.4种siRNA干扰成纤维细胞24小时后,NRAP的mRNA及蛋白表达量均有显著下降,其中siRNA47抑制效果最为显著.结论 成功筛选出可有效抑制成纤维细胞NRAP表达的siRNA,为观察阻断NRAP表达后应力诱导OPLL细胞成骨的变化奠定了基础.
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关键词
后纵韧带骨化症伴肌动蛋白相关锚定蛋白小干扰核糖核酸Ossffication of posterior longitudinal ligamentNebulin related anchoring proteinsiRNA
主题词
蛋白(Egg White)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)后纵韧带骨化(Ossification of Posterior Longitudinal Ligament)核糖(Ribose)成纤维细胞(Fibroblasts)
分类号
R318
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-5972.2013.06.002
发布时间
2014-04-02
基金项目
2010年度“上海市卫生局科研课题”（基金2010138）
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