换一批
换一批摘要目的:建立重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ)中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统,并从生物化学与凝血活性等方面对活化的重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦa)进行分析.方法:利用公司专有的CHO细胞表达系统构建rhFⅦ表达载体并筛选稳定高产细胞株.通过经典的离子交换技术纯化并活化rhFⅦ.通过SDS-PAGE、Western Blot对rhFⅦa进行生物化学分析,用生物膜干涉技术(BLI)验证其与组织因子(TF)的结合,利用对发色底物酶切、活化部分凝血活酶时间(APTT)/凝血酶原时间(PT)、血栓弹力仪(TEG)对其凝血活性进行了深入的分析并与成熟产品NovoSeven进行了比较.结果:rhFⅦ在CHO细胞流加培养中得到了成功表达,其表达量可达 50 mg/L.成功激活的rhFⅦa显示出与NovoSeven高度相似的生物化学与凝血活性.结论:利用CHO系统成功表达并纯化获得活化的rhFⅦ,其在生化与凝血活性等方面与市售产品一致,为实现rhFⅦa国产化奠定了坚实的基础.
更多相关知识
关键词
人重组凝血因子Ⅶ活化的人重组凝血因子ⅦCHO细胞组织因子甲型血友病recombinant human coagulation factor Ⅶactivated recombinant human coagulation factor ⅦCHO cellstissue factorhemophilia A
分类号
R554.1
栏目名称
研究报告
DOI
10.3969/j.issn.2096-0387.2023.05.013
发布时间
2023-12-05
- 浏览2
- 被引0
- 下载4
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
