C11ORF94基因缺陷导致精卵融合失败的机制研究
Research on the Mechanism of C11ORF94 Deficiency Results in the Failure of Sperm-Oocyte Fusion
摘要目的:配子的受精、融合是个体发育的起点,其中精子-卵子细胞膜融合是受精过程中关键步骤之一.本研究旨在利用敲除小鼠探寻精卵融合的潜在机制.方法:利用CRISPR/Cas9 系统敲除睾丸特异高表达基因C11ORF94,观察敲除小鼠生育情况及体外受精情况.利用HEK293T-卵母细胞结合实验及精子-卵母细胞融合实验观察C11ORF94 蛋白对精卵结合与融合的影响.针对睾丸组织进行体外Pull-down和质谱分析以筛选C11ORF94 的互作蛋白.结果:C11ORF94 基因敲除小鼠严重不育并表现精卵融合障碍,卵胞浆内单精子注射可挽救该表型.针对C11ORF94 互作蛋白的聚类分析表明C11ORF94 参与细胞分泌途径以及小GTP酶信号转导通路.结论:实验证实,C11ORF94 通过影响分泌途径来影响精子与卵子的融合能力.此外,卵胞浆内单精子注射可挽救该基因缺陷的表型.
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