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流行性乙型脑炎病毒和寨卡病毒双重Luminex xMAP液相蛋白芯片检测方法的建立

Development and Application of Dupliplex Luminex xMAP Liquid Array Assay for Simultaneous Detection of Japanese Encephalitis Virus and Zika Virus

摘要黄病毒科虫媒病毒是以蚊、蜱等节肢动物为媒介传播的人畜共患病原体家族,是危害畜牧业和公共卫生最广泛的一类虫媒病毒,由于病毒血症持续时间较短和窗口期滞后而限制了分子检测的效用.本研究拟建立同时检测流行性乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)和寨卡病毒(Zika Virus,ZIKV)双重Luminex xMAP液相蛋白芯片方法,为虫媒病毒早期诊断提供参考.采用两种免疫荧光磁珠分别偶联抗JEV和ZIKV NS1 蛋白单克隆抗体,捕获样品中JEV和ZIKV抗原,与生物素标记NS1 蛋白单克隆抗体和藻红蛋白标记链霉亲和素进行杂交反应,利用Luminex 200 系统进行检测.建立的双重Luminex xMAP方法对登革病毒、西尼罗病毒、黄热病病毒等其他虫媒病毒无交叉反应,特异性良好,批内和批间变异系数低于 10%,对JEV和ZIKV NS1 蛋白的检测限均为 4 ng/mL.

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