换一批重组人CK2β亚基的原核表达、纯化与鉴定
Prokaryotic Expression, Purification and Characterization of Recombinant Human Protein Kinase CK2β Subunit
摘要将构建成功的人蛋白激酶CK2β亚基cDNA的重组质粒, 转化大肠杆菌BL21 (DE3), 在IPTG诱导下表达. 表达蛋白大多数以不溶形式存在. 6L(约10.2 g)表达菌抽提得到约20 mg的可溶性表达产物, 通过P11磷酸纤维素一步层析分离, 得到6.8 mg纯化蛋白. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示纯化的蛋白为一分子质量26 ku的单一蛋白带.蛋白质印迹结果证明:纯化的表达产物与抗人CK2β抗体可发生特异性免疫反应. CK2β亚基对CK2α有激活作用, 纯化的CK2α和β亚基在等摩尔混合时即可组成有最大生物活性的全酶. 实验结果有力地证明了克隆表达与纯化的重组蛋白是人蛋白激酶CK2β亚基.
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DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2000.02.024
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国科学院项目（非规范项目）（39870900）
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