换一批
换一批青岛海葵强心活性多肽在毕氏酵母中的分泌表达
Cloning of a Synthetic Gene Coding for Cardiotonic Polypeptide Anthopleurin-QD2 and Its Expression in Pichia pastoris
摘要青岛海葵中存在两种具有增强心肌收缩功能的多肽类毒素(分别命名为Ap-QD1和Ap-QD2).通过分析已经得到Ap-QD2的氨基酸序列,按照毕氏酵母的偏爱密码子设计并合成了Ap-QD2的cDNA.将合成cDNA序列通过PCR扩增及一系列分子克隆操作导入毕氏酵母表达载体pPICZαA中,以电穿孔方法转化毕氏酵母GS115和KM71,并进行转化子的表型及高拷贝化筛选.其中的KM71(Muts)的转化子经摇瓶发酵,每升发酵液可表达约20 mg的重组Ap-QD2产物,通过纯化可得到7 mg纯的有天然生物学活性的Ap-QD2基因工程产物.
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主题词
海葵(Sea Anemones)发酵(Fermentation)心肌收缩(Myocardial Contraction)肽类(Peptides)氨基酸序列(Amino Acid Sequence)
分类号
Q786
栏目名称
研究报告
DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2000.04.021
发布时间
2004-01-08
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