换一批
换一批用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
Analyzing Plant Gene Expression Differences Using a Silver Staining Based DDRT-PCR Protocol
摘要通过调整差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等试剂的用量,优化了适用于银染检测的DDRT-PCR方法.PCR扩增产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后,银染能检测到多而清晰的条带.泳道中的条带数最少为40个,最多达80个,平均为60个,条带大小分布在100～900 bp范围,灵敏度为5 pg/mm2.此方法操作简便快速,灵敏度高,重复性好.采用这个改良的方法,分析了拟南芥野生型和ast突变型基因表达的差异.从16 000个cDNA扩增产物条带中筛选出28个差异条带.二次PCR扩增后,进一步筛选出13个差异条带,其中7个是野生型特异表达的,6个是突变型特异表达的,为进一步认识ast突变表型的产生机制奠定了基础.
更多相关知识
- 浏览205
- 被引29
- 下载3
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
