换一批
换一批腺病毒介导的uPAR反义核酸转移抑制肿瘤细胞的侵袭
Inhibition of Invasiveness of Human Lung Cancer Cells by Adenovirus-mediated Gene Transfer of Antisense RNA for Urokinase Receptor
摘要为了观察尿激酶受体(uPAR)反义核酸对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用,用PCR方法扩增uPAR cDNA 5′端-46 bp～+454 bp一段长500 bp的序列,利用DNA重组技术将其克隆到病毒载体pAdeno-X中, 构建出重组腺病毒载体pAdeno-X-uPAR(-)和pAdeno-X-uPAR(+).线性化后的重组腺病毒载体转染HEK293细胞7天后,可以获得滴度分别为1.5×108 pfu/ml和0.5×108 pfu/ml的uPAR反义和正义核酸表达重组腺病毒,分别命名为Ad-uPAR(-)和Ad-uPAR(+).以不同的病毒感染指数(MOI)感染人肺巨细胞癌高转移株95D肿瘤细胞,3天后用RNA印迹法可以检测肿瘤细胞uPAR正义和反义核酸表达水平,随着MOI的升高,Ad-uPAR(-)感染的肿瘤细胞uPAR蛋白水平逐渐下降,肿瘤细胞的体外侵袭能力也明显下降,而感染Ad-uPAR(+)的肿瘤细胞无明显变化.结果表明,重组腺病毒可以表达uPAR正义和反义核酸,uPAR反义核酸可以明显抑制人肺巨细胞癌高转移株95D肿瘤细胞在体外的侵袭能力.
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主题词
肿瘤(Neoplasms)细胞(Cells)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)尿激酶型纤溶酶原激活物(Urokinase-Type Plasminogen Activator)感染(Infection)
分类号
Q556+.9
栏目名称
研究报告
DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2003.05.020
发布时间
2003-12-12
基金项目
国家自然科学基金
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