钙网蛋白122~180片段基因克隆、表达和活性分析
Calreticulin 122~180 Fragment Inhibits Angiogenesis and Suppresses Tumor Growth
摘要钙网蛋白是高等动物细胞中普遍存在的一种钙结合蛋白,近年发现它及其N端1~180位氨基酸能抑制内皮细胞生长和血管生成.为了寻找高效和小分子质量的血管生成抑制因子,用PCR技术扩增出钙网蛋白N端122~180位氨基酸的DNA序列,克隆进原核表达载体pET-3c,转化大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导后,该片段以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的35.4%.包涵体经变性溶解、复性和初步纯化后,纯化产物可以抑制人脐静脉内皮细胞的生长,鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成和小鼠原位黑色素瘤的生长.
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