活性型粒酶B基因的异位表达导致多核巨细胞产生
Ectopic Expression of Active Granzyme B Gene Leads toMultinuclear Giant Cells
摘要粒酶B(granzyme B,GrB)是一种重要的丝氨酸蛋白酶参与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)介导的细胞杀伤过程.为研究粒酶B在肿瘤细胞中异位表达后能否诱导细胞死亡,将构建的活性型粒酶B(GrBa)基因及其酶活性中心突变型(mGrBa)基因的真核表达载体,以脂质体法瞬时转染HeLa细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)共表达、间接免疫荧光、细胞计数、MTT等方法,观察到GrBa蛋白的异位表达引起多核巨细胞形态异常,并且表达细胞的生长受到抑制.Percoll分离多核巨细胞后,观察到其生长状态较差,是导致生长抑制的直接原因.细胞骨架破坏和具有多极纺锤体的异常有丝分裂,推测是多核巨细胞不断产生的根源.上述结果为GrBa应用于肿瘤基因治疗提供了一定依据.
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