肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白CEP65相互作用蛋白的筛选与鉴定
Searching for Interaction Partners of Cancer and Embryo Expression Protein CEP65 by Yeast Two-hybrid Screening
摘要CEP65蛋白(cancer and embryo expression protein 65)为肿瘤单克隆抗体3H11所识别的抗原分子,RT-PCR及RNA印迹检测表明,CEP65蛋白表达于肿瘤及胚胎组织.为了研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制,以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交体系筛选人胚胎组织cDNA表达文库.从5.2×106个克隆中筛选得到14个阳性克隆,并在酵母体系中通过不同方法得到验证.在此基础上,选取在双杂交中作用明显的51号克隆,与CEP65作GSTpull-down实验,结果证明,CEP65与51号阳性克隆蛋白确能相互作用.生物信息学分析发现,CEP65与51号阳性克隆蛋白相互作用,可能通过WW结构域或者蛋白激酶C对细胞的增殖与分化起到调节作用.
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