甘蓝型油菜羧基转移酶α亚基全长cDNA的克隆及在大肠杆菌中表达
Cloning of The Full Length cDNA of Carboxyltransferase Alpha Subunit From Brassica napus and Its Expression in Escherichia coli
摘要通过分析拟南芥与大豆的羧基转移酶α亚基的cDNA序列,运用RT-PCR、RACE和基因组步行(Genomewalking)三种技术进行组合克隆,首次从油菜开花后20~29天的幼胚中,克隆到质体定位的羧基转移酶α亚基的全长cDNA.同源性分析表明,其开放阅读框(ORF)编码的氨基酸序列与拟南芥、大豆的羧基转移酶α亚基的同源性分别为85%、59%.将此cDNA去除叶绿体转运肽编码序列的成熟肽编码序列,克隆到表达载体pHBM625上,蛋白质印迹分析,它在大肠杆菌中成功表达.
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