换一批摘要在真核细胞基因功能研究中,RNA干涉(RNAi)已成为一种强有力的选择性沉默基因表达的实验工具.建立一套可在哺乳动物培养细胞中高效、经济地表达siRNA的载体系统是RNA干涉研究的必要前提之一.从HepG2细胞基因组DNA中克隆得到H1全长启动子(374bp),以之为基础构建了两套RNA干涉载体系统,pSL和带有绿色荧光蛋白(EGFP)标签的pESL,并对p53基因进行了相应的RNA干涉研究.干涉质粒瞬时转染HepG2细胞后,分别利用半定量RT-PCR和蛋白质印迹检测p53表达水平.与商品化载体pSilencerTM3.1-H1 hygro相比,pSL和pESL对p53基因表达具有更高的干涉效率.结果显示:干涉载体pSL和pESL能高效特异地下调目的基因表达,可作为哺乳动物中基因功能分析的有效工具.
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DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2005.04.015
发布时间
2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
科技部科研项目（2002CB513103）
中国科学院项目（非规范项目）（30200073）
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