换一批
换一批摘要随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,己成为功能基因组学研究的一个重要环节.应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSC101-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL-neo为正/反向筛选系统,可以快速、高效地对BAC进行剪切、插入、替换等操作,其中能够进行抗性筛选的一步BAC修饰只需一周时间,以插入非抗性标记基因Cre为代表的两步BAC修饰在两周内即可完成.通过阿拉伯多糖诱导调控和简单地变化培养温度,能使pSC101-BAD-gbaA依托质粒在发挥完Red/ET同源重组作用后自然消失,最终获得完整而纯净的修饰后BAC,为加快功能基因组学研究提供了一个可靠的实验平台.
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主题词
同源重组(Homologous Recombination)染色体, 人工, 细菌(Chromosomes, Artificial, Bacterial)基因组(Genome)基因(Genes)基因组学(Genomics)
分类号
Q78
栏目名称
技术与方法
DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2005.05.014
发布时间
2005-06-16
基金项目
国家自然科学基金
第三军医大学校科研和教改项目
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