以NF-κB为靶的药物筛选方法的建立与应用研究
Establishment and Application of a Screening Assay Based on NF-κB Signal Transduction
摘要核转录因子-κB(NF-κB)通过调节其靶基因的表达,在机体免疫应答、炎症与肿瘤的发生发展过程中发挥着重要功能,因此也被认为是预防和治疗肿瘤与炎症的理想靶点.pNiFty-SEAP质粒被成功地转入HEK293细胞,因此该转染细胞含有5×NF-κB基序的增强子、SEAP报告基因和Zeocin抗生素抗性筛选基因.通过检测报告基因表达水平可反映NF-κB的活化状态.在以pNiFty-SEAP/HEK293细胞为基础建立的筛选体系中,TNFα和PMA等已知的NF-κB激活剂能剂量与时间依赖性地促进NF-κB的活化,而PDTC和NAC等NF-κB抑制剂的作用则相反.该筛选体系不仅具有稳定、特异、高通量等特点,而且可同时检测NF-κB的激活剂与抑制剂,将为发现作用于NF-κB信号传导通路的抗肿瘤与免疫调节药物提供有效的实验方法.
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