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小鼠肝脏RNA编辑酶ADAR1 4种剪切体:克隆、表达及功能分析

Functional Characterization and Comparison of Four Splicing Alternatives of Mouse Liver A-to-I RNA Editing Enzyme ADAR1

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摘要RNA编辑是DNA转录为RNA后遗传信息发生改变的一种方式.A-to-I RNA编辑酶ADAR1(adenosine deaminase that acts on RNA 1)具有将pre-mRNA中特定的腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷的功能.通过RT-PCR技术从小鼠肝脏组织中克隆了小鼠A-to-I RNA编辑酶ADAR1的4种剪切体,采用荧光示踪技术研究其在细胞内定位,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建了ADAR1重组杆状病毒并在sf9昆虫细胞内将其进行了表达,最后对表达产物进行了活性鉴定.结果发现,小鼠ADAR1在小鼠肝脏组织中主要以4种剪切方式存在,分别命名为ADAR1-La\Lb和ADAR1-Sa\Sb.这4种ADAR1剪切体在细胞内分布有着明显的区别,ADAR1-La\Lb主要分布于胞浆,而ADAR1-Sa\Sb主要分布于细胞核及核仁.Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达的4种ADAR1剪切体蛋白的双链RNA编辑活性明显不同,提示各个ADAR1剪切体的底物识别和特异性RNA编辑功能可能有所不同.ADAR1剪切体的克隆和表达以及它们在细胞内定位和编辑活性的差异的发现为进一步研究其结构和功能的关系及寻找它们的新底物奠定了基础.

作者张德新 ^[1] 赵澎涛 ^[1] 赵青川 ^[2] 罗晓星 ^[3] 聂勇战 ^[4] 苏映军 ^[4] 杨静华 ^[4] R.RABINOVICI ^[4] 樊代明 ^[1] 学术成果认领

作者单位第四军医大学全军消化疾病研究所肿瘤生物学国家重点实验室,西安 710032 ^[1] 第四军医大学普通外科学系,西安 710032 ^[2] 第四军医大学药理学系,西安 710032 ^[3] Department of Surgery, Yale School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA ^[4]

关键词 RNA编辑杆状病毒重组蛋白 ADAR1

医学主题词小鼠(Mice)病毒(Viruses)蛋白(Egg White)细胞(Cells)组织(Tissues)

分类号 R3（基础医学）

栏目名称

研究快报

DOI 10.3321/j.issn:1000-3282.2006.07.006

发布时间 2006-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（30371337）