换一批
换一批铜绿假单胞菌LasR基因反义核酸原核表达载体的构建及对该菌毒力的影响
Construction of Prokaryotic Expression Vectors of Antisense Nucleic Acid of LasR Gene and Its Effect on The Virulence of Pseudomonas aeruginosus
摘要PCR扩增LasR基因,用反向克隆法构建LasR基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasRantisense并转化铜绿假单胞菌,经酶切、PCR及测序鉴定重组载体.RT-PCR检测LasB基因和LasI基因mRNA的表达,NAD法测定外毒素A的活性,紫外分光光度计测定绿脓菌素的产生水平.用转化pUCP18/lasRantisense质粒菌株感染大鼠呼吸道并进行病理组织切片检查.PCR扩增出约720 bp片段,与GenBank(No:NC 002516)报道的基因片段大小一致,构建了LasR基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasRantisense,并成功转化铜绿假单胞菌,且有效表达,使转化菌的毒力因子弹性蛋白酶、外毒素A和绿脓菌素表达水平均降低.与标准株感染的大鼠比较,转化pUCP18/lasRantisense质粒菌株感染的大鼠支气管炎症明显减轻.上述结果表明,LasR基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasRantisense可以降低铜绿假单胞菌的毒力.
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主题词
基因(Genes)毒力(Virulence)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)转化, 细菌(Transformation, Bacterial)感染(Infection)
分类号
R378.99
栏目名称
研究报告
DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2007.10.007
发布时间
2007-12-17
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- 被引6
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