换一批
换一批棉花细菌人工染色体的荧光原位杂交(BAC-FISH)技术
Fluorescence In situ Hybridization of Bacterial Artificial Chromosome in Cotton
摘要细菌人工染色体荧光原位杂交(BAC-FISH)技术是植物染色体识别、物理作图等分子细胞遗传学研究的重要工具,但对于某些物种尤其是多倍体植物,由于大量重复序列的存在等问题,使得该技术应用受到很大的限制.通过选择棉花分子遗传图中高重组区的微卫星位点(simple sequence repeats,SSR)标记的策略,筛选到不含或含有少量重复序列的细菌人工染色体(BAC)克隆,同时,在通用FISH技术程序基础上,通过改进发根、变性、洗脱条件等步骤,构建出适合于棉花的BAC-FISH技术,简化了操作流程的同时,获得稳定的杂交结果及较高的检出率;并通过将一随机获得的BAC进行染色体的物理定位,进一步引入双探针、双色及重复杂交技术,显示了该技术的成熟与良好的应用前景和价值.
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主题词
染色体, 人工, 细菌(Chromosomes, Artificial, Bacterial)原位杂交, 荧光(In Situ Hybridization, Fluorescence)染色体, 植物(Chromosomes, Plant)遗传学研究(Genetic Research)植物(Plants)
栏目名称
技术与方法
DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2007.11.015
发布时间
2007-12-28
基金项目
教育部长江学者和创新团队发展计划
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