换一批利用受体漂白荧光共振能量转移技术研究β-分泌酶在活细胞内的二聚化
Detection of β-Secretase Dimerization in Living Cells Using Acceptor Photobleaching FRET
摘要β淀粉样肽(Aβ)在阿尔茨海默病(AD)患者脑内的产生、聚集和沉积是AD的一个固有病理特征,也被普遍认为是AD的重要发病机理之一.β-分泌酶(BACE)对淀粉样前体蛋白(APP)的裂解是Aβ产生的关键步骤,β-分泌酶抑制剂是AD药物治疗的一个重要发展方向,因此对BACE结构的了解具有重要意义.利用受体漂白荧光共振能量转移(FRET)技术首次在活细胞内研究BACE的二聚化结构.通过基因工程技术分别构建了青色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白(YFP)标记的全长BACE(BACE-FL)和BACE活性部分(BACE-NT),应用共聚焦荧光显微镜和受体漂白FRET技术研究了BACE-FL和BACE-NT在细胞中的表达和定位,以及它们在活细胞内的存在形式.实验结果表明:a.BACE-FL在内质网至细胞膜均有表达,主要分布在高尔基体、细胞膜和内体等细胞器中,而BACE-NT则被滞留在内质网里.b.BACE-NT是单体结构,而BACE-FL在活细胞内则以二聚体的形式存在.证明,BACE的跨膜序列和C端对BACE的转运和定位具有重要作用,其二聚体结构由这些序列决定,而不由其活性位点决定.
更多相关知识
主题词
荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer)细胞(Cells)研究(Research)阿尔茨海默病(Alzheimer Disease)蛋白(Egg White)
分类号
Q631
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3282.2008.03.005
发布时间
2008-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)（2006AA020801）；
国家自然科学基金（90508003）
- 浏览206
- 被引5
- 下载6
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
