不同生态型芦苇叶片蛋白质双向电泳系统的筛选和优化
Selection and Optimization of 2-DE System for Leaf Proteome Profiling of Different Ecotypes of Reed Growing in Natural Habitats
摘要通过优化组合植物蛋白质提取方法及与之匹配的蛋白质裂解液,采用改进的O',Farrel双向电泳系统,以自然牛境野牛芦苇叶片为材料,筛选出一种适合纤维含量高、革质化明显的4种不同生态型芦苇(水生芦苇、轻度盐化草甸芦苇、重度盐化草甸芦苇、沙丘芦苇)叶片蛋n质分析的双向电泳系统,即以饱和酚.醋酸铵/甲醇沉淀法提取叶片蛋白质样品,经裂解液[8 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,4%CHAPS,65 mmol/L DTT,2%Ampholine(pH3.5~10:pH5~8=1:4)]裂解后按 80μg上样,银染后获得背景清晰、蛋白质分辨率较高的双向电泳图谱.该系统用于水稻等植物叶片蛋白质双向电泳分析,同样获得较好的电泳图谱和分辨率.
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