鼠TNF-α功能位点及其中和性抗体结合位点研究
The Study of Mouse TNF-a Functional Domain and Its Neutralizing Antibody Binding Site
摘要肿瘤坏死因子TNF-α是一个多功能的细胞因子,许多免疫系统疾病的发生和TNF-α的过量释放有关.对TNF-α的功能研究有助于了解这些疾病的发生机制,而以TNF-α为靶点的抗体可用于治疗多种自身免疫性疾病.通过研究一个抗鼠TNF-α中和性单克隆抗体的结合位点,确定了鼠TNF-α行使其生物学功能的关键部位.首先利用酵母展示技术确定了中和性抗体9C6的结合位点是鼠TNF-α的第29~40氨基酸线性片段.然后在此区域引入点突变,找到鼠TNF-α与9C6抗体结合的关键位点.最终用大肠杆菌表达鼠TNF-α和其突变体蛋白,通过L929细胞杀伤实验,证实与9C6抗体结合的关键位点也是决定鼠TNF-α生物学功能的关键位点.
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