炭疽芽孢杆菌致死因子突变株K518E和L519C的筛选及活性分析
Screening and Activity Analysis of Lethal Factor Mutants——K518E and L519C From Bacillus anthracis
摘要为研究炭疽毒素致死因子(lethal factor,LF)致死机理,更有效地防治炭疽,对LF基因1 550~2 324 bp之间的片段进行了随机突变实验.通过细胞毒性实验筛选LF突变体库,结果获得5株活性降低突变体.进一步对单点突变体蛋白进行亲和纯化,首次得到了K518E、L519C两种突变蛋白,对其进行纯蛋白活性检测和竞争抑制实验,发现这两种突变蛋白活性显著降低,表明518位赖氨酸和519位亮氨酸对LF功能起着非常重要的作用.并且发现,K518E对野生型LF具有一定的抑制作用,对LF作用机理的研究有一定帮助.
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