换一批基于烟草脆裂病毒构建同时表达2种外源蛋白的载体及其应用
Construction of Dual Expression Vector Based on Tobacco Rattle Virus and Its Application for Analysis of Protein Function in Nicotiana benthamiana
摘要目的 构建在整个寄主植物中能同时表达两个非融合蛋白的病毒载体.方法 以烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)基因组RNA2的农杆菌侵染性克隆pYL156为材料,缺失TRV RNA2的2b基因5'端279 bp并将其起始密码子ATG改变为AGG、同时引入豌豆早枯病毒(pea early-browning virus,PEBV)外壳蛋白(coat protein,cp)基因启动子,获得pTRV2e2载体;在pTRV2e2载体的2b和PEBV的cp启动子下游插入不同的外源基因,测定病毒TRVe2表达外源蛋白的能力、携带外源基因后重组病毒的稳定性以及分析蛋白质的生物学功能.结果 病毒TRVe2能快速同时表达2个非融合的外源蛋白,且至少能表达70 ku外源蛋白,且该病毒携带～2.0 kb外源基因能稳定存活于寄主植物中;病毒TRVe2可用于分析蛋白质的生物学功能以及2个蛋白质间的相互作用.结论 本文构建的重组病毒TRVe2为快速有效地表达2个外源蛋白以及分析2个蛋白质间的相互作用提供技术工具.
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栏目名称
DOI
10.16476/j.pibb.2021.0180
发布时间
2022-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
转基因生物新品种培育重大专项资助项目（2018ZX08001-03B）
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