换一批摘要蓖麻蚕核糖体RNA基因非转录间隔区(NTS)有一长约1 kb的核骨架结合区(scaffold-associated region, SAR)。 将这一序列克隆到含荧光素酶(luciferase)报告基因的真核表达载体pLu中, 在阳离子脂质体的介导下对NIH3T3细胞进行瞬时转染(transient transfection)及稳定转化(stable transformed)株的筛选, 然后检测SAR在瞬时转染及稳定整合条件下对荧光素酶报告基因表达活性的影响。 实验结果表明, 在稳定转化的细胞中, 该SAR对luciferase基因的表达有明显的激活作用, 增强基因表达活性约15倍； 而在瞬时表达的条件下, SAR激活基因表达的作用不明显。 说明SAR增强基因的表达可能需要整合在染色体上才能完成。 我们用Southwestern印迹法实验进一步证实了蓖麻蚕rRNA基因的SAR能特异性地与NIH3T3细胞核骨架蛋白结合, 因此该SAR的作用具有非组织特异性。
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关键词
蓖麻蚕核糖体RNA基因SAR元件荧光素酶基因Southwestern印迹法silkworm Attacus ricinirRNA geneSARluciferase geneSouthwestern blotting
分类号
Q5，Q7（生物化学）
栏目名称
发布时间
2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划（973计划）（G1999053902）
国家自然科学基金（39770416）
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