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虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-II的1H-NMR信号归属和二级结构分析

Sequence-specific Assignment of 1H-NMR Resonance and Determination of the Secondary Structure of HWTX-II

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摘要虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-II是从虎纹捕鸟蛛Selenocosmia huwena的毒液中分离出的一种新型杀虫肽。应用2D-NMR技术研究该毒素分子的溶液结构特点, 通过分析水及重水DQF-COSY、COSY、TOCSY和NOESY等1H-NMR谱, 识别出HWTX-II全部37个氨基酸残基自旋体系；通过NOESY谱中的dαN、dαδ、dβN和dNN联系完成了序列专一的谱峰归属, 确认了所有主链质子和除了Lys侧链εNH2质子外的所有侧链质子的化学位移, 为完全解析HWTX-II的溶液三维构象奠定了基础。并且通过核磁数据分析, 确定HWTX-II的二级结构特点是含有较多的伸展构象, 尤其是C端有一个典型的双股反平行的β折叠(Trp27～Cys29和Cys34～Lys36), 分子中缺乏螺旋结构。这些二级结构特点与已探明结构的其他蜘蛛毒素的基本相同。