换一批幽门螺杆菌HspA融合蛋白口服疫苗的构建
A Candidate Oral Vaccine to Helicobacter pylori: Fusion Protein of HspA and CtxB
摘要构建表达幽门螺杆菌的保护性抗原成分热休克蛋白A亚单位(HspA)和霍乱毒素B亚单位(CtxB)的重组融合蛋白的生物工程菌株，以此制备幽门螺杆菌的口服疫苗。用PCR方法扩增hspA和ctxB两个目的基因片段，将它们分别克隆至pSK(+)质粒上，然后插入含T7启动子pET-22b(+)的表达载体中，构建含双基因的表达质粒pET-hct，转化E.coliBL21(DE3)，经IPTG诱导表达融合蛋白HCT。经测序，hspA-ctxB(hct)融合基因片段由726bp组成，可以编码242个氨基酸残基的多肽。经SDS-PAGE和免疫印迹分析检测发现，融合基因表达的蛋白质相对分子质量约为30kD。融合蛋白经镍离子柱纯化、复性后，和HspA共同标记同位素125I，然后给小鼠灌胃，结果观察到HCT组小鼠血清中的125I的放射量要明显高于HspA组(P＜0.001)，且吸收峰值时间明显提前。融合蛋白中的CtxB可明显促进小鼠对HspA的吸收，HCT融合蛋白可以作为预防和治疗幽门螺杆菌感染的候选口服疫苗。
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分类号
Q93（微生物学）
发布时间
2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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