丁酸梭菌1,3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT的克隆及在大肠杆菌中的表达
Cloning and expression of 1, 3-propanediol oxidoreductase gene from Clostridium butyricum in Escherichia coli
摘要以丁酸梭菌(Clostridium butyricum )基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到1,3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT,将它连接到pMD18-T载体上,得到重组质粒pMD-dha T,对此重组质粒进行序列测定,对其DNA序列分析表明,dhaT基因全长为1158 bp.将 dhaT基因插入表达载体pSE-380中,构建成重组子pSE-dha T,并在大肠杆菌JM109中进行诱导表达.研究表明,以1,3-丙二醇为底物时,基因工程菌在37 ℃下,以1.0 mmol/L IPTG 诱导14h,酶活力达到16.28U/mL,比原始菌株提高5.6倍.
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