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首页 > 生物加工过程 > 持续性内切酶EG5C-1的改造及酶学性质

持续性内切酶EG5C-1的改造及酶学性质

Modification of processive endoglucanase EG5C-1 and its enzymatic activity

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摘要为了提高glycosyl hydrolase 5(GH5)家族的持续性内切酶EG5C-1的催化活性,对EG5C-1进行同源建模和分子对接,分析确定了活性架构区域内的23个关键氨基酸残基,并通过丙氨酸扫描、饱和突变和组合突变等方法最终获得催化活性显著提高的突变体D70Q/S235W,并分析其酶学性质.结果表明:D70Q/S235W的最适反应温度为60℃,最适pH为6.0.以羧甲基纤维素钠(CMC)和微晶纤维素(Avicel)为底物进行水解产物分析,突变体D70Q/S235W的主要水解产物为纤维二糖和纤维三糖.本研究筛选获得催化活性和酶学性质显著提高的突变体,可为纤维素酶的蛋白质工程改造奠定基础.

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作者 吕科旻 [1] 周雨朦 [2] 吴斌 [1] 何冰芳 [3] 学术成果认领
作者单位 南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211800 [1] 南京正大天晴制药有限公司,江苏南京222062 [2] 南京工业大学药学院,江苏南京211800 [3]
关键词 持续性内切酶活性架构蛋白质工程酶学性质纤维素酶
分类号 Q816（蛋白质工程）
栏目名称
生物制造
DOI 10.3969/j.issn.1672-3678.2022.05.004
发布时间 2022-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2018YFA0902200） 国家自然科学基金（21776135） 国家自然科学基金（81573338） 江苏省基础研究计划（BE2018395）
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生物加工过程

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2022年20卷5期

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