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停滞棒杆菌遗传改造工具和启动子文库构建

Genetic modification tools and synthetic promoter library for Corynebacterium stationis

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摘要停滞棒杆菌是用于5'-肌苷酸生产的重要微生物底盘.为利用代谢工程技术来创建和优化高效细胞工厂,在停滞棒杆菌中构建遗传改造工具和启动子文库十分必要.本研究使用pCG1复制子构建了大肠杆菌-停滞棒杆菌穿梭载体,建立停滞棒杆菌外源DNA转化方法、基于自杀质粒同源重组的基因敲除方法,最终形成了停滞棒杆菌异源基因稳定表达系统;停滞棒杆菌游离质粒的电转化效率达到(2.3±0.3)x103 cfu/μg;构建停滞棒杆菌的合成启动子文库,筛选得到24个强度差异达30倍的启动子元件,用于停滞棒杆菌中的基因精细表达调控.

作者叶光正 ^[1] 余心宇 ^[2] 林钰宽 ^[3] 蔡友华 ^[3] 邢新会 ^[4] 陈武 ^[3] 薛正莲 ^[5] 张翀 ^[2] 学术成果认领

作者单位安徽工程大学生物与食品工程学院,安徽芜湖 241000 ^[1] 清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心工业生物催化教育部重点实验室,北京 100084 ^[2] 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司,广东肇庆 526060 ^[3] 清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心工业生物催化教育部重点实验室,北京 100084;清华大学深圳国际研究生院生物医药与健康工程研究院,广东深圳 518055 ^[4] 安徽工程大学生物与食品工程学院,安徽芜湖 241000;安徽省工业微生物分子育种工程实验室,安徽芜湖 241000 ^[5]

关键词停滞棒杆菌转化效率穿梭质粒启动子基因敲除 Corynebacterium stationis transformation efficiency shuttle plasmid promoter gene knockout

分类号 Q782

栏目名称

生物制造

DOI 10.3969/j.issn.1672-3678.2024.02.004

发布时间 2024-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（21938004）