转录因子YAP1在X线诱导的HaCaT细胞损伤中的作用和作用机制
Study on the role and mechanism of transcription factor YAP1 in X-ray-induced damage of HaCaT cells
摘要放射性皮肤损伤是放射治疗过程中常见的并发症.利用人永生化表皮细胞(HaCaT),采用X线体外照射,构建放射性皮肤损伤细胞模型,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EDU)增殖实验和单克隆实验证实:X线能够抑制HaCaT细胞的活性和增殖能力.通过2',7'二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)和二氢乙锭(DHE)探针检测X线对细胞内活性氧(ROS)水平的影响,并通过定量聚合酶链反应(qPCR),Western-blotting和免疫荧光实验探讨X线抑制细胞增殖的机制.结果显示:X线能够抑制HaCaT细胞活力和增殖能力,诱导细胞内ROS的增加,下调细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞周期蛋白E1(CyclinE1)的表达.进一步的机制研究显示:X线能够抑制转录因子Yes相关蛋白1(YAP1)的表达和核转位,可能是导致细胞增殖能力降低的重要原因.本研究揭示了 X线造成HaCaT细胞损伤的分子机制,为预防和治疗放射性皮肤损伤提供了分子靶点.
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