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重组枯草芽孢杆菌转化生成活性维生素D3的发酵工艺优化

Optimization of fermentation process for the recombinant Bacillus subtilis to synthesize 25(OH)VD3

摘要25-羟维生素D3(25(OH)VD3)是人体内VD3的主要活性形式之一,具有极高的药用价值.以实验室前期构建的一株可对VD3的C-25位进行区域选择性羟化的优势重组菌WB600-pMA5-CYP109E1I85F-Fdx-FdR为研究对象,首先通过单因素实验和正交试验,优化培养基中碳源、氮源及金属离子的种类及添加量.结果表明:重组菌的最佳培养基组分为蛋白胨50 g/L、酵母粉50 g/L、葡萄糖30 g/L、K2HPO49g/L.在该条件下,可将0.25 g/L的底物VD3转化合成25(OH)VD3,其质量浓度达到10.01 mg/L,较优化前提高了 5.5倍.进一步考察助溶剂的种类及添加量对重组菌转化VD3生成25(OH)VD3的影响后发现,在培养基中添加3%(体积分数)的二甲基亚砜(DMSO)时,产物25(OH)VD3的质量浓度提高到17.74 mg/L.本研究结果表明,通过发酵工艺优化可大幅提高重组菌合成25(OH)VD3的产量,未来可进一步研究其在发酵罐水平合成产物的能力,对25(OH)VD3的工业化生产具有重要意义.

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生物加工过程

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2025年23卷5期

483-490,500页

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