基于农用固体废弃物再利用的柠檬烯生物制备
Bio-production of limonene based on the utilization of agricultural solid waste
摘要农业固体废弃物含有丰富的廉价碳源,以农业固体废弃物为原料,利用微生物细胞工厂合成天然产物已成为生物制造领域的研究热点.D-柠檬烯(D-limonene)是一类单环单萜类化合物,凭借其特有的双键结构及生物活性,被广泛应用于生物农药、食品添加剂、医药中间体及日化原料等领域.基于实验室前期通过合成途径的重构与优化,获取的一株从头合成D-柠檬烯的酿酒酵母工程菌株MKL8,本研究敲除甾醇转录阻遏物MOT3,并过表达了甾醇转录激活因子UPC2-1(G888D),菌株的D-柠檬烯产量由452.65 mg/L提升至878.08 mg/L;进一步对D-柠檬烯生物合成相关的调控因子进行敲除后发现,单独敲除YER134C基因可以明显提高菌株D-柠檬烯的产量,达到 1 029.24 mg/L.基于此,利用柠檬坏果破碎液为辅助碳源进行培养基优化后发现,2%(体积分数)的添加量可使菌株D-柠檬烯的合成量提高至 1 129.75 mg/L;当利用柠檬坏果破碎液作为单一营养源时,菌株可从头合成20.25 mg/L的D-柠檬烯.该研究对资源化利用废弃物生产D-柠檬烯具有一定的借鉴意义.
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