热带假丝酵母细胞膜通透性改造对十二碳二元酸合成效率的影响
Modifications of the cell membrane permeability of Candida tropicalis and the impacts on the efficiency of dodecanedioic acid synthesis
摘要十二碳二元酸(dodecanedioic acid,DDA)是一种重要的长链二元羧酸,具有广泛的工业应用前景和显著的合成价值.热带假丝酵母(Candida tropicalis)作为一种潜在的DDA生产菌株,其生产效率受限于细胞膜对疏水性底物(如十二烷)的通透性.麦角甾醇是真菌细胞膜的关键成分,其合成受阻可显著改变细胞膜的通透性.本研究通过同源重组技术,敲除了热带假丝酵母中编码麦角甾醇生物合成途径中的C-5 甾醇去饱和酶(ERG3)和羊毛甾醇14α-去甲基化酶(ERG11)的基因,并优化了发酵条件,以实现更高的产物合成效率.结果表明:敲除菌株的细胞膜通透性显著增强,与未敲除菌株相比,ERG3 缺失菌株、ERG11 缺失菌株的 DDA 产量分别提高了 38.50%、19.33%;优化摇瓶培养条件后,发酵 144 h后DDA产量为 9.03 g/L.本研究为通过基因工程调控细胞膜通透性以提高疏水性底物的代谢效率提供了新思路,并为热带假丝酵母在生物制造中的应用提供了理论依据.
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