摘要目的:分析大肠杆菌JM109感受态形成因素,提高转化效率.方法:采用不同生长状态、不同转化溶液、不同保存时间及热激处理时间的细菌制备感受态,分析转化效率.结果:以20mmol/L MgCl2+80mmol/L CaCl2为处理液,经活化培养OD600为0.82的菌液制备感受态细胞,4℃放置12~24 h之内,42℃热激处理60s,转化效率最高,可达9.8×106~1.2×107 cfu/μg DNA(pUC19).随着质粒长度增加,转化效率下降.结论:感受态细胞形成与生长状态关系密切,金属离子、有机溶剂对感受态的形成影响显著.感受态形成过程中,细胞可能发生了一系列的生理变化.
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