换一批小鼠survivin基因重组真核表达载体的构建及鉴定
Construction and Identification of the Recombinant Eucaryotic Plasmid Encoding Survivin Gene of Mice
摘要目的:应用质粒pEGFP-N1构建含小鼠survivin基因的重组真核载体.方法:采用Oligo核酸软件对Genbank上所发表的小鼠survivin mRNA序列进行分析,自行设计一对分别含有Hind Ⅲ、Bam H Ⅰ酶切位点的survivin基因上下游引物,利用PCR扩增出该基因的全序列cDNA,并将其定向克隆入pEGFP-N1的多克隆位点,构建pEGFP-N1/survivin重组真核表达载体.然后通过卡那霉素抗性筛选、双酶切及PCR鉴定,选取鉴定正确的克隆测序.结果:双酶切与测序结果表明目的基因序列克隆正确,成功构建了含有小鼠survivin基因的重组真核表达载体.结论:重组真核表达载体pEGFP-N1/survivin构建成功,为下一步研究survivin在未成熟树突状细胞中诱导分化与致耐受作用奠定基础.
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关键词
survivinpEGFP-N1pEGFP-N1/survivin未成熟树突状细胞survivinpEGFP-N1pEGFP-N1/survivinimmature dendritic cell
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发布时间
2010-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30772043）
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