换一批
换一批摘要目的:利用灰绿曲霉EU7-22发酵产纤维素酶,从中分离到β-葡萄糖苷酶,分析其理化特性,确定其最佳活性条件.方法:灰绿曲霉EU7-22发酵液离心后,上清液经硫酸铵沉淀、Phenyl 6 Fast Flow(high sub)疏水层析和Sephacryl S-200凝胶层析,获得纯化的β-葡萄糖苷酶.结果:纯酶的比活性为5.1 IU／mg,得率为13.89％.SDS-PAGE凝胶电泳分析表明该酶是单亚基蛋白,其分子量为56.2 kDa.在pH 4.0～6.0范围内,β-葡萄糖苷酶具有较高的稳定性,该酶的最适酶促反应pH为5.0.当β-葡萄糖苷酶在温度低于60℃的缓冲液中温育1 h后,酶活损失不大,表现了较好的稳定性;当该酶在温度高于60℃的缓冲液中温育1 h后,酶活迅速丧失.β-葡萄糖苷酶在70℃时具有最大催化活性.结论:灰绿曲霉EU7-22发酵产生的β-葡萄糖苷酶具有较高活性,具有分子量较小、最佳催化温度较高的特点.
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