换一批基于原核表达的副溶血性弧菌类毒素疫苗对海水鱼类免疫保护作用
Vibrio parahaemotytifus' tdh Cloning & Expression and Study on the Toxoid Vaccine Protection of Marine Fish
摘要目的:实现副溶血性弧菌溶血毒素基因tdh克隆与表达,并以表达产物TDH作免疫原,研究其对海水鱼免疫活性的影响.方法:PCR扩增tdh;构建重组质粒(pET-28-TDH)；IPTG诱导表达；SDS-PAGE检测:以纯化的TDH融合蛋白脱毒为类毒素免疫原免疫健康真鲷,测定其血清中过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活性变化；用副溶血性弧菌病原攻毒,检测免疫保护作用.结果:tdh基因成功克隆并表达；表达蛋白相对分子量为21 kDa,证实为TDH蛋白；类毒素免疫真鲷后,其血清中总超氧化物歧化酶(T- SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和过氧化氢酶(CAT)活力在注射后48h、24h、24h、2Ah达到最高,最高点分别高于对照组77％、328％、75％、381％；72 h后均恢复至对照组水平.结论:类毒素对真鲷免疫系统具有明显的刺激作用；类毒素免疫后对攻毒的真鲷保护率达50％.
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分类号
S941.42
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-311X.2011.04.095
发布时间
2011-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家级星火计划（No.2010GA690170）
连云港市科技攻关计划（CN0917）
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