换一批恶性疟原虫pfs25多拷贝基因在毕赤酵母中的表达分析
Expression and Analysis of the pfs25 Multi - copy Genes in Pichia pastoris
摘要目的:对恶性疟原虫pfs25的多拷贝基因重组菌株在毕赤酵母中进行表达分析,研究基因拷贝数对Pfs25蛋白表达量的影响.方法:构建重组质粒pAO815 - αpfs25,利用BgllⅡ- BamHI同尾酶的特点,将基因表达框AOX1 - αpf25 - AOX1 (TT)插入到单拷贝表达质粒,依次重复,构建多拷贝重组质粒pAO815 -(αpfs25)n,线性化后电转化毕赤酵母GS115,用MD平板筛选并进行表达分析.结果:构建得到1、2、3、4、5、6、7、8、10、12和14个pfs25基因拷贝的重组菌株,8拷贝pfs25基因的重组菌株表达量最高.结论:成功得到了pfs25基因的多拷贝表达重组菌株,经分析,多拷贝pfs25基因的目的蛋白表达量与其拷贝数并不呈线性正相关.
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DOI
10.3969/j.issn.1004-311X.2012.03.59
发布时间
2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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